恩诺沙星与噬菌体联合应用体外抑菌试验
刘晓;王先德;邹德志;赵成新;房超;徐文彬;李瑞丽;于洋;张晓勇;张炜;为了探讨恩诺沙星与噬菌体联合应用的效果,本研究首先采用纸片扩散法(K-B法)测定恩诺沙星对4株致病性大肠杆菌和2株沙门氏菌的敏感性,并通过试管倍比稀释法测定恩诺沙星对敏感组菌株的最小抑菌浓度范围为0.0008~0.0015μg/m L,最小杀菌浓度范围为0.0008~0.0488μg/m L;恩诺沙星对耐药组菌株的最小抑菌浓度范围为0.0488~0.1953μg/m L,最小杀菌浓度范围为0.0977~0.1953μg/mL。通过恩诺沙星与噬菌体联合应用试验可知,不同噬菌体与恩诺沙星联合应用达到最佳抑菌效果时,所需恩诺沙星的浓度不同。在噬菌体与抗生素的协同作用中,抗生素浓度的选择尤为关键,不能过高,也不能过低。菌株对恩诺沙星敏感与否,与噬菌体联合应用时的抑菌率无直接关联。恩诺沙星与噬菌体联合应用时,恩诺沙星浓度为1/8MIC对大肠杆菌ECRZY5T2的抑菌率100%;恩诺沙星浓度为1/4MIC时,对大肠杆菌ECKZA7F的抑菌率100%;其余菌株,恩诺沙星浓度为MIC时抑菌率100%。相同的恩诺沙星浓度,噬菌体与恩诺沙星联合应用的抑菌率,比单用恩诺沙星的抑菌率高。在本试验中,恩诺沙星浓度为1/8 MIC时,与噬菌体联合应用,对恩诺沙星敏感的大肠杆菌菌株ECRZY5T2与ECKZA7F的抑菌率分别由58.9%和87.3%,提升至100%和97.8%;对恩诺沙星敏感的沙门氏菌菌株SAQD2T1与SAMP3T3的抑菌率分别由57.6%和69.1%,提升至76.8%和82%;对恩诺沙星不敏感的两株大肠杆菌菌株ECNJP2与EC1418的抑菌率分别由66.7%和71.0%提升至83.4%和80.7%。
猴痘病毒荧光定量PCR检测方法的建立
孙健;赵柏林;猴痘病毒(Monkeypox virus,MPXV)作为一种重要的人畜共患病毒,其在全球范围内传播和蔓延引起了广泛关注,尤其是在近年来的疫情中,及时有效的检测方法显得尤为重要。为建立一种快速诊断MPXV的检测方法,根据2022年公布的MPXV的靶基因片段F3L(462 bp,GenBank登录号AF380138.1)保守区域,设计了1对特异性的引物和1条探针,建立了猴痘病毒荧光定量PCR检测方法。结果显示,本方法仅能有效检测MPXV,与牛结节皮肤病病毒、非洲猪瘟病毒VP72片段质粒、圆环病毒Ⅱ型标准品均无交叉反应;对重组质粒标准品的最低检测限为5.1 copies/μL;批内与批间的重复试验变异系数均小于6%。结果表明,本试验方法具有较强的敏感性、特异性和稳定性,可以用于猴痘病毒的快速鉴别诊断。
一株鸭源粪肠球菌的分离鉴定和致病性研究
徐凤霞;王振;许明清;汪建华;刘晓钰;沈扬扬;王田;于菲菲;本研究针对山东省泰安市某养殖场樱桃谷肉鸭死亡病例,通过细菌分离培养、革兰氏染色、生化特性鉴定及16S rRNA基因序列分析,鉴定出导致肉鸭死亡的病原为粪肠球菌。该菌在营养琼脂上形成光滑球菌,Baird-Parker琼脂培养板上呈黑色菌落,革兰氏染色为阳性,生化特性符合粪肠球菌标准,16S rRNA基因序列与GenBank中参考序列(登录号ON745463.1)同源性高达99.86%。药敏试验结果显示,该菌对氨苄西林、阿莫西林等敏感,但对替米考星、盐酸大观林可霉素等耐药。致病性试验结果显示,该菌株对肉鸭有显著致病性,感染鸭只表现出精神萎靡、脚垫红肿等症状,死亡率高达50%,并在病鸭肝脏、脑组织和跗关节处分离到该菌。本研究为粪肠球菌的快速鉴定、防控策略制定及合理用药提供了重要依据。
一株猪源科氏葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析
于明;陈亨利;董鹏;散仁;王荣芳;本研究对一例散户家猪突然死亡病例进行病原菌分离鉴定,无菌采集病死猪心脏、肝脏、脾脏等器官,分离纯化得到一株细菌,经生化试验、16S rRNA测序,确定该菌株为一株猪源科氏葡萄球菌。通过动物致病性试验,确定该菌株对小鼠有较强致病性。药物敏感性检测结果显示,该菌株对多西环素与氟苯尼考等3种药物表现为敏感,对头孢噻肟等6种药物表现为中度敏感,对卡那霉素等6种药物表现为耐药,为多重耐药菌株。本研究将为科氏葡萄球菌的研究及引发疾病的治疗提供参考。
1日龄长颈鹿血常规和血液生化指标的分析
王丛菊;徐旸;陶玉静;陈园园;刘青;本研究采集欧乐堡动物王国人工饲养繁育的23只1日龄长颈鹿血液样本,检测25项血常规和24项血液生化指标,并对性别差异进行分析。结果显示,血常规指标中平均红细胞血红蛋白量和平均红细胞血红蛋白浓度雌性显著高于雄性(P<0.05),其他22项指标均无差异性(P>0.05)。23项血液生化指标均无性别差异性(P>0.05)。本试验是健康1日龄长颈鹿血常规和血液生化指标的首次详细检测,为圈养长颈鹿血液标准值的确定提供了基础数据,对长颈鹿的饲养繁育、健康管理和疾病诊断等具有指导意义。
山东省四地蛋鸡养殖场高致病性禽流感卵黄抗体水平监测
刘雨萌;李超;李宁;为了了解山东省规模化产蛋鸡场高致病禽流感免疫情况及感染风险,本研究利用血凝血抑试验,对山东省泰安市、菏泽市、聊城市、济南市四地16家存栏蛋鸡万只以上的规模化蛋鸡养殖场高峰期所产鸡蛋进行随机抽检,测定H5-14和H7-4的卵黄抗体效价,共检测鸡蛋256枚。数据显示,四地H5-14和H7-4抗体滴度均较高,可达26~211,抗体保护合格率均为100%。研究表明,山东省内蛋鸡群接种高致病性禽流感疫苗免疫状态良好,保护水平较高,感染风险低。